Харчове поширення гепатиту А Недавні дослідження щодо виживання вірусу, його переносу та інактивації

Syed A Sattar

1 Центр досліджень мікробіології довкілля, Медичний факультет, Університет Оттави;

Тетро Джейсон

1 Центр досліджень мікробіології довкілля, Медичний факультет, Університет Оттави;

Сабах Бідавід

2 Управління з питань харчування, Канада охорони здоров'я, Оттава, Онтаріо

Джефф Фарбер

2 Управління з питань харчування, Канада охорони здоров'я, Оттава, Онтаріо

Анотація

Вірус гепатиту А (HAV), збудник гепатиту А, є основною проблемою охорони здоров’я (1), і він спричинює значну захворюваність та економічні втрати на глобальному рівні (2). HAV - п’яте найбільш часто повідомляване інфекційне захворювання в США, і воно посідає шосте місце серед 10 найбільших збудників харчових продуктів (3). Гепатит А також є єдиною вірусною хворобою, що підлягає передачі в їжу, у Північній Америці (4) і є найбільш часто повідомляваною хворобою, яку можна запобігти вакцинам у Сполучених Штатах (5). Він входить до списку серйозних небезпек у Додатку V Управління з контролю за продуктами та ліками США (4).

HAV, представник роду Hepatovirus з сімейства Picornaviridae (6,7), проливається у фекаліях заражених особин. Вірус передається переважно через потрапляння фекально забрудненого матеріалу (8). Відомий лише один серотип ВГА, а зараження вірусом дає тривалий імунітет. Виділення вірусу з калом починається задовго до появи клінічних ознак та симптомів і триває протягом декількох днів. Багато людей, особливо діти, можуть заразитися вірусом, не хворіючи. Такі "мовчазні" розповсюджувачі вірусу можуть передавати вірус іншим оточуючим. Ці фактори унеможливлюють ідентифікацію та ізоляцію заражених людей до того, як вони почнуть виводити вірус. Отже, наголос на належній особистій та екологічній гігієні є надзвичайно важливим.

За останні роки в Канаді зросла захворюваність на гепатит А (9). Серед причин цього збільшення - збільшення поїздок до районів із вищою ендемічністю захворювання та з них; збільшення сексуальних практик високого ризику та вживання заборонених наркотиків; дедалі більше дітей у дитячих садах із відповідно більшою можливістю HAV поширюватися на інших членів сім'ї та громади; та збільшення імпорту свіжих фруктів та овочів з регіонів з менш жорстким екологічним контролем. Такі продукти харчування були причетні до спалахів гепатиту А в Сполучених Штатах (10).

Цей короткий огляд узагальнює висновки наших недавніх досліджень щодо здатності ВГА виживати на руках і непористих поверхнях навколишнього середовища, а також у кількох продуктах харчування та на деяких продуктах, а також про потенційну корисність теплового та гамма-опромінення при інактивації HAV на експериментально забруднені молочні продукти та продукти харчування (продукти), які часто споживаються в сирому вигляді або піддаються мінімальній обробці. Він також висвітлює сучасні знання про перенесення HAV із забруднених накладок пальців на чисті поверхні та предмети під час випадкового контакту. Також даються рекомендації щодо подальших досліджень.

РОЗПРОСТРАНЕННЯ ВИРОБНИЦТВА HAV

Види продуктів, які беруть участь у передачі ВГА, включають молюсків, салати, бутерброди, овочі, фрукти, відновлений заморожений апельсиновий сік, морозиво, сир, рисовий пудинг, крижаний пиріг, заварний крем, молоко, хліб, печиво та інші сирі або недоварені продукти ( 4). Забруднення харчових продуктів ВГА може відбуватися різними способами: фрукти та овочі, вирощувані та/або зрошувані фекально забрудненими матеріалами; молюски, вирощені та видобуті з фекально забруднених вод (4); переробка та приготування їжі у фекально забрудненому обладнанні; та поводження з готовими до вживання їжею інфікованими особами з поганою особистою гігієною (11). Харчові підприємства з поганими санітарними умовами та неадекватними системами утилізації відходів, а також незадовільною виробничою практикою можуть також сприяти забрудненню харчових продуктів.

ВИЖАВАННЯ ТА ПЕРЕНІД ХАВ

ВГА може легко пережити заморожування, зберігатися в прісній або солоній воді до 12 місяців (12) і може зберігати свою заразність протягом декількох днів до тижнів у висушених фекаліях (13). Він також досить стійкий до багатьох умов навколишнього середовища, а також до фізичних та хімічних речовин (14,15).

Виживання вірусів на живих і неживих поверхнях:

HAV може вижити протягом декількох годин на людських руках (14) та декількох днів на навколишніх поверхнях у приміщенні (16). Здатність вірусу виживати на руках вивчали шляхом суспендування лабораторно адаптованого штаму (HM-175) вірусу в калі, розміщення його на подушечках пальців дорослих добровольців та відновлення вірусу протягом декількох годин. Елюати титрували на інфекційний вірус методом аналізу нальоту і визначали швидкість розпаду зараженості вірусом. Період його напіввиведення становив від 5,50 год до 7,70 год (таблиця 1). Це свідчить про те, що вірус може зберігати свою зараженість на руках протягом більшої частини робочої зміни, якщо обробники продуктів харчування або особи, що доглядають, не можуть знезаразити їх належним чином і часто. Варто також зазначити, що в порівняльних дослідженнях було встановлено, що ВГА виживає на руках довше, ніж деякі інші патогенні віруси та бактерії людини (17).

ТАБЛИЦЯ 1

Виживання вірусу гепатиту А на руках дорослих добровольців

ABCDE

Період напіввиведення (год)	6.10	7.20	6.10	7.70	5.50
Значення Кі *	0,0019	0,0016	0,0019	0,0015	0,0021

HAV може виживати на непористих поверхнях навколишнього середовища навіть краще, ніж на шкірі людини, в широкому діапазоні температур навколишнього середовища та відносної вологості. Це тестували, поміщаючи фекально суспендований вірус на диски з нержавіючої сталі та елююючи його протягом декількох днів, щоб виміряти його зараженість. Результати цих експериментів представлені в таблиці 2. При температурі охолодження 5 ° C HAV мав період напіввиведення щонайменше 103 год (більше чотирьох днів), незалежно від RH. При 20 ° C період його напіввиведення був найдовшим (майже 7,8 днів), коли відносна вологість була низькою і найкоротшою (трохи більше двох днів) при найвищому рівні вологості. Навіть при 35 ° C HAV показав період напіввиведення 65 год (2,7 доби) при низькій вологості. Він погано виживав при 35 ° C з вологістю 95% ± 5%. У порівнянні з ВГА, поліовірус типу 1 (Sabin), прототипний пікорнавірус, показав погану виживаність за тих самих умов тестування.

ТАБЛИЦЯ 2

Період напіввиведення у годинах (значення Ki) ​​* вірусу гепатиту А (HM-175) та поліовірусу типу 1 (Сабін) на непористих поверхнях навколишнього середовища при різних рівнях температури повітря та відносної вологості

% Відносна вологістьВипробуваний на віруси Температура тримання (С) 25 ± 555 ± 580 ± 595 ± 5

Гепатит А	5	169 (0,0041)	151 (0,0046)	123 (0,0056)	103 (0,0067)
20	187 (0,0037)	128 (0,0054)	71 (0,0097)	51 (0,0136)
35	65 (0,0106)	50 (0,0138)	21 (0,0329)	2 (0,0984)
Поліовірус 1 типу	20	2 (0,3928)	NT	NT	7 (0,0984)

NT не перевірено. Адаптовано з посилання 16

З огляду на все більше використання готових до вживання овочів, що продаються в упаковці із модифікованою атмосферою (MAP), Bidawid та співавт. (18) нещодавно вивчали виживання HAV на салаті в MAP, що зберігається при кімнатній температурі та 4 ° C. Результати показали, що виживання ВГА при 4 ° C було приблизно однаковим у MAP та за звичайних умов упаковки, і що виживання вірусу було трохи кращим у MAP, що містить більш високі рівні діоксиду вуглецю, коли заражений салат зберігався при кімнатній температурі.

Хоча для підтвердження та розширення цих висновків необхідні подальші дослідження, посилене виживання HAV у матеріалі, що міститься у MAP, що зберігається при кімнатній температурі, може бути зумовлене інгібуванням етилену вуглекислим газом, що призводить до зменшення фізіологічного псування овочів, таких як салат, і, можливо, менш токсичний вплив на вірус. Можливо, MAP може мати інгібуючий ефект на реплікацію вірусу в клітинах хазяїна. Попередні дослідження (19) показали, що корінна мікрофлора у водному середовищі, наприклад, шкідлива для виживання кишкових вірусів. Ці висновки також підкреслюють важливість уникнення забруднення харчових продуктів перед їх пакуванням у MAP.

Перенесення вірусу між забрудненими та чистими поверхнями:

HAV може потрапляти в продукти після їх збирання або приготування шляхом подальшого контакту з фекально забрудненими руками або поверхнями навколишнього середовища. Оскільки це є вирішальним питанням для розуміння генезису багатьох спалахів харчових продуктів гепатиту А, а також для оцінки ризику та введення належних заходів з контролю навколишнього середовища, автори спробували розглянути цей аспект за допомогою кількісного експериментального підходу. Кожна донорська поверхня була забруднена фекально суспендованим HAV, і посівний матеріал давали висохнути різною довжиною в умовах навколишнього середовища. Потім поверхня донора була приведена в контакт з чистою поверхнею реципієнта з тим самим тиском, тертям і тривалістю контакту, як це відбувалося б у звичайній роботі або в побутових умовах, і вимірювали кількість перенесення інфекційного вірусу (14).

Дані, узагальнені в таблиці 3, показують, що не тільки передача вірусу відбувається при випадковому контакті 10 секунд між забрудненими і чистими поверхнями (тиск 0,2 кг/см 2), але і те, що вік інокуляту на поверхні донора має різницю в кількість переданого вірусу. Коли рівень тиску підвищували до 1 кг/см 2 та/або тертя застосовували під час контакту, кількість переданого інфекційного вірусу зросла удвічі-втричі (14). У той час як передача вірусу не проводилась, поки щеплення було ще мокрим, очікувалося, що вона буде набагато більшою, незалежно від природи донорської та реципієнтської поверхонь.

ТАБЛИЦЯ 3

Перенесення інфекційного вірусу гепатиту А між зараженими та чистими поверхнями

Передача зПерекладу в ПФУ на донорській поверхні через 0 хв Час сушіння на донорській поверхні (хв) Передана ПФУ% Передана

Металевий диск	Накладка для пальця	10795	20	2667	24.7
60	1277	11.8
120	575	5.3
180	233	2.16
240	0	0
Накладка для пальця	Металевий диск	12 275	20	3484	28.4
60	2092 рік	17,0
120	908	7.4
180	158	1.3
240	50	0,4
Накладка для пальця	Накладка для пальця	10433	20	2800	27,0
60	1833 рік	17.6
120	933	8.9
180	167	1.6
240	17	0,2

Блоки формування нальоту ПФУ. Адаптовано з посилання 14

Зовсім недавно автори також вивчали перенесення ВГА з рук на продукти харчування. Це було виконано шляхом приведення висушеного посіву, що містить HAV, (0,2 кг/см 2, без будь-якого тертя) з експериментально забрудненими подушечками пальців дорослих добровольців чистими шматочками салату протягом 10 с (20). Це призвело до перенесення майже 10% інфекційного вірусу.

Наскільки відомо авторам, ці дані є першою кількісною оцінкою передачі ВГА та взаємозв'язку між тиском та тертям під час контакту, і повинні суттєво сприяти створенню належних стратегій контролю навколишнього середовища та навчанню виробників харчових продуктів про необхідність уникати перехресних забруднення харчових продуктів. Ці висновки також підкріплюють той факт, що одного лише промивання рук може бути недостатньо, щоб перервати розповсюдження харчової ВГА без регулярного та належного очищення та знезараження поверхонь та предметів, які можуть часто контактувати з продуктами.

МАЄ ІНТАКТИВАЦІЮ ТЕПЛОМ

Тепло є найефективнішим заходом для інактивації ВГА (21,22). Повної інактивації HAV у м’ясі молюсків можна досягти після нагрівання (розпарювання) молюсків до внутрішньої температури від 85 ° C до 90 ° C протягом 1,5 хв (23).

Нещодавно автори перевірили вплив вмісту жиру на термостійкість HAV у знежиреному молоці (1%), гомогенізованому молоці (3,5% жиру) та столових вершках (18% жиру) (24). Дані в таблиці 4 показують, що звичайні температури пастеризації не є достатніми для інактивації HAV у цих молочних продуктах. Крім того, збільшення вмісту жиру, мабуть, відіграє захисну роль, і, отже, може сприяти підвищеній термостійкості вірусу в таких продуктах.

ТАБЛИЦЯ 4

Час (хв.), Необхідний для різних рівнів log10 в інфекційності вірусу гепатиту А, коли молочні продукти з різним рівнем жиру нагріваються

---